Mètodes per establir una reacció de precipitació

Taula de continguts:

Mètodes per establir una reacció de precipitació
Mètodes per establir una reacció de precipitació
Anonim

Aquest article estarà dedicat al fenomen de la reacció de precipitació. Aquí considerarem les característiques de la formulació d'aquest fenomen, el fenomen de la difusió, les característiques generals, el paper en la vida humana i molt més.

Introducció al fenomen

reacció de precipitació característica general
reacció de precipitació característica general

La precipitació és un fenomen de tipus serològic, durant el qual els antígens solubles interaccionen amb els anticossos i, com a resultat, s'observa una precipitació: un precipitat.

La característica general de la reacció de precipitació és una forma de influència coordinada d'antigen i anticossos. Aquest tipus d'interaccions permeten determinar la presència d'antígens desconeguts a la substància de prova afegint anticossos i antígens coneguts. El procés de precipitació sense presència de sals empitjorarà, i el millor òptim es troba en el rang de 7,0-7,4 pH.

Constituents d'una reacció

components de la reacció de precipitació
components de la reacció de precipitació

Hi ha tres elements principals entre els components de la reacció de precipitació:

  1. Un antigen de naturalesa molecular. Està en estat de tipus fi, és a dir, aixòsoluble. A més, aquest antigen s'anomena precipitat, que és un lisat o extracte de teixit, etc. Un precipitogen té una diferència característica amb un aglutinogen, que rau en la mida de les partícules de les quals consta. L'aglutinogen té una mida cel·lular inherent i els precipitatògens són proporcionals a la mida de la molècula. La solució d'antigen es caracteritza per la transparència.
  2. Un anticòs que es troba en sèrum de sang humana, així com en sèrum de diagnòstic immunitari, que conté els anticossos estudiats.
  3. Els electròlits són solucions de clorur de sodi que són isotòniques.

Producció de precipitats

És impossible establir una reacció de precipitació sense un precipitat, que s'obté triturant materials i extrent-ne els antígens proteics. L'extracció es produeix per ebullició o altres mètodes.

Els lisats, així com els extractes de teixits i òrgans, sèrum sanguini, diversos tipus de filtrats basats en cultius de brou microbià, així com l'extracte de sal de microorganismes i substàncies d'autolisat, són un aspecte sorprenent. exemple de precipitatògens.

Configuració en precipitacions

Ara considerem el mètode per configurar la reacció de precipitació.

Es realitza una reacció de precipitació en anell, que té lloc en tubs d'assaig especialment preparats. El sèrum s'introdueix a la cavitat dels plats, abocant-lo sobre la paret amb l'ajuda d'un broc de pipeta. A continuació, es col·loca acuradament la quantitat adequada de precipitador a la part superior i, a continuació, el tub es porta a una posició vertical des d'una horitzontal. Configurar i tenir en compte la reacció de precipitació és una operació molt meticulosa. El resultat s'enregistra després de l'aparició d'un anell blanc a la vora entre l'antigen i l'anticòs. Si els elements que reaccionen de la reacció es corresponen entre si, aleshores s'uneixen, però això es nota després d'un llarg període de temps de la seva interacció.

La reacció de precipitació també es porta a terme en una placa de Petri o sobre un got. diapositiva, on es transfereix el gel d'agar, aplicant-lo en una petita capa. Després que s'endureixi al gel, es tallen un petit nombre de pous en els quals es col·locaran antígens i anticossos. Hi ha dues maneres de realitzar aquesta acció: el mètode d'immunodifusió radial i la doble immunodifusió.

no s'utilitza la reacció de precipitació
no s'utilitza la reacció de precipitació

Informació general

La mecànica del treball de precipitació és semblant al dispositiu d'aglutinació. Sota la influència del sèrum de tipus immune, l'antigen, que ja ha entrat en la reacció, redueix el seu grau de dispersitat. Una condició important és la transparència tant del sèrum com de l'antigen.

Podeu millorar el registre de la reacció si superposeu antígens als anticossos. Com a resultat, es pot observar l'aparició de precipitats en forma d'anell. Aquest fenomen s'anomena precipitació en anell i es realitza en tubs especials amb un diàmetre de 2,5 a 3,5 mm. Un dels exemples més habituals d'una reacció de precipitació és el diagnòstic d'àntrax.

La precipitació permet determinar el nivell de toxigenicitat d'un cultiu de diftèria en agar.

Durant la reacció consideradaes produeix la precipitació de complexos antigènics i anticossos. La precipitació és un fenomen immunològic que permet determinar la quantitat d'anticossos en el sèrum sanguini d'una persona mal alta o vacunada i dels animals.

Conseqüència de la titulació

Mètodes per establir una reacció de precipitació
Mètodes per establir una reacció de precipitació

És important saber que les dades obtingudes mitjançant la valoració del mètode anterior no són quantificables. Per crear i analitzar una avaluació quantitativa del nombre d'anticossos continguts, M. Heidelberger i E. Kabat van desenvolupar una tècnica de reacció especial que es basa en la recerca i identificació de la zona d'equivalència. La barreja del nombre d'edat dels antígens amb un volum constant d'antisèrum comporta un augment del precipitat format inicialment i, de nou, disminueix a causa de l'augment de la capacitat de dissoldre els complexos d'antigens. En determinar la quantitat d'anticossos en els sobrenedants continguts en cada tub, podeu trobar que a un cert nombre de plats amb anticossos f altaran líquid. Aquí, en comparació amb altres provetes, es formarà el precipitat més gran. A causa d'això i de la resta del precipitat de proteïna antigènica del valor total de les proteïnes, és possible obtenir el valor exacte dels anticossos continguts en el volum del sèrum específic que s'està estudiant. A més, la quantitat de molècules de proteïnes del precipitat es determina per la quantitat de nitrogen o mitjançant mètodes colorimètrics.

Avaluació de valors

fixació i explicació de la reacció de precipitació
fixació i explicació de la reacció de precipitació

L'estimació dels valors de precipitació en metodologia diagnòstica ha de tenir en compte la possibilitat de la presència en el sèrum immune d'un anticòs que no tingui la propietat de la precipitació, de la qual cosa es dedueix que el propi precipitat pot no ser format després de reaccionar amb antígens. La llista d'aquestes molècules inclou anticossos incomplets i algunes espècies del grup de les globulines gamma-A.

La reacció de precipitació en condicions de laboratori troba la seva aplicació en diversos tipus de modificacions. Per exemple, la reacció de termoprecipitació s'utilitza per detectar antígens bacterians de botulisme, àntrax, etc., que no pateixen desnaturalització tèrmica. A diferència de la precipitació en anell, aquest tipus de reacció utilitza filtrats del material en qüestió en estat bullit.

L'anàlisi de la reacció de precipitació en una mescla complexa no permet caracteritzar les propietats dels elements individuals de la mescla. En aquests casos, una persona recorre al mètode de precipitació en agar i també utilitza immunoelectrofènesi.

Precipitació difusa

reaccions de precipitació
reaccions de precipitació

En aquesta àrea d'investigació, hi ha el concepte de reacció de precipitació difusa (RPD). Es basa en la capacitat de difondre en el gel d'anticossos i antígens solubles. La difusió és la capacitat d'una molècula d'una determinada substància per penetrar en les molècules d'una altra, que és causada pel moviment tèrmic.

El gel és un sistema de tipus dispers en què la fase líquida es distribueix uniformement en la fase sòlida. Molt sovint, s'utilitza gel d'agar per a aquesta reacció.

Després de donar els paràmetres, encondicions en què les molècules es poden difondre entre si, la seva reunió anirà acompanyada de la formació d'un complex antigen + anticossos. Aquesta neoplàsia és capaç de difondre's, en trobar-se en el propi gel, i precipitarà, adoptant la forma d'una tira que es pot detectar a ull nu. Si l'antigen i l'anticòs són homòlegs, no es formarà cap banda.

La creació de les condicions en què es produirà la difusió mentre es troba a la capa d'agar implica abocar els components, però el nombre total de pous i la seva posició relativa ve determinat per decidir el tipus de tasca que es requereix. RPD ofereix a una persona la capacitat de detectar i identificar virus aïllats desconeguts mitjançant proves amb sèrums d'anticossos coneguts.

Aplicació

reacció de precipitació difusa
reacció de precipitació difusa

La precipitació s'utilitza àmpliament no només en el diagnòstic de mal alties, sinó que també troba la seva aplicació en l'examen mèdic forense. És difícil imaginar una anàlisi en la qual sigui possible determinar l'espècie de sang, part d'un òrgan o teixit trobat en una arma criminal que no utilitzi la reacció de precipitació. Durant aquest procés s'utilitzen sèrums precipitants, que s'obtenen immunitzant diversos animals i ocells. És important que el nivell de títol sèric no sigui inferior a 1:10000, i també ha de tenir una especificitat suficient. A partir de la taca detectada de sang o la seva escorça, es fa un extracte per a la física. solució, a la qual s'exposarà méssèrum precipitant. D'acord amb aquesta reacció, és possible establir els tipus de proteïnes de teixits i òrgans tant dels humans com dels animals. L'obtenció d'extractes ennuvolats obliga a recórrer a la precipitació sobre agar.

Conclusions

Analitzant la informació llegida, podem concloure que les reaccions de precipitació són extremadament importants per a una persona, ja que permeten diagnosticar diversos antígens mitjançant anticossos, aquest fenomen també s'utilitza àmpliament en l'exploració mèdica forense i permet identificar el tipus de sang, teixit o òrgan en relació amb un determinat tema. Hi ha diversos tipus i mètodes de precipitació, que s'utilitzen d'acord amb les necessitats emergents del problema que es resol.

Recomanat: