Microscòpia de luminescència: característiques d'estudi

Taula de continguts:

Microscòpia de luminescència: característiques d'estudi
Microscòpia de luminescència: característiques d'estudi
Anonim

El terme "microscòpia" té arrels gregues. En traducció, vol dir l'estudi d'objectes mitjançant instruments d' alta precisió. Recentment, la fluorescència i la microscòpia electrònica s'han fet cada cop més populars.

microscòpia de fluorescència
microscòpia de fluorescència

Resolució

Sota, per regla general, entenen la distància mínima a la qual es poden localitzar objectes clarament distingibles. El grau de penetració en el món microscòpic, la capacitat de considerar la mida de l'element en estudi dependrà de la resolució de l'equip. A gran augment, els límits dels objectes es poden fusionar. En conseqüència, hi ha certs límits més enllà dels quals l'aproximació d'elements no té sentit.

Mètode de microscòpia de luminescència: mecanisme

Quan l'energia absorbida per una substància es converteix en radiació visible, es produeix una resplendor. S'anomena luminescència. Aquest fenomen es deu al fet que algunes substàncies, sota la influència de la llum, comencen a emetre raigs amb una longitud d'ona diferent (generalment gran). A més, alguns objectes que, amb il·luminació normal, tenen un certcolor, sota la influència dels ultraviolats canvien de color.

mètode de microscòpia de fluorescència
mètode de microscòpia de fluorescència

Especificacions

Un objecte que no es pot veure sota la llum ultraviolada pot emetre una brillantor brillant si es tracta amb una substància especial. En ell, els elements brillen en diferents colors a la foscor. La força de la radiació és diferent, però, per regla general, és petita. En aquest sentit, la microscòpia de fluorescència és efectiva en una habitació enfosquida. Quan s'utilitza aquest tipus d'estudi, l'objecte es veu a la llum que ell mateix emet. La composició química dels teixits, cèl·lules afectarà la qualitat de l'estudi. La microscòpia de fluorescència es considera fins a cert punt un estudi histoquímic.

Classificació

La microscòpia de fluorescència pot ser primària o secundària. En aquest últim cas, l'objecte es processa amb compostos especials que donen una brillantor. La microscòpia fluorescent primària es basa en la pròpia capacitat de l'element per emetre llum.

microscòpia electrònica i fluorescent
microscòpia electrònica i fluorescent

Equip

La microscòpia de fluorescència es realitza amb diversos dispositius. El seu element principal és l'il·luminador. Està equipat amb una làmpada UV. A més, els dispositius utilitzen un conjunt de filtres. En alguns dispositius, hi ha un munt de configuracions diferents. Depenent del color que s'utilitzi per excitar la luminescència, ultraviolada o blau, es col·loca un filtre adequat entre la font de llum i l'objecte en estudi. Com que la resplendor d'un element microscòpic és energèticament més feble que la llum excitant, només es captarà sota una condició. L'excés de raigs de la font s'ha de tallar amb un filtre groc-verd. Es troba a l'ocular del dispositiu. L'efecte més pronunciat de la luminescència serà quan el filtre talla completament els raigs que emanen de la font de llum.

En què consisteix una instal·lació de llum visible? Conté una font de llum brillant i un microscopi biològic. Es col·loca un filtre blau-violeta entre el mirall del dispositiu i la làmpada. Pot ser FS-1, UFS-3, etc. El filtre groc es posa a l'ocular del microscopi. Amb la seva ajuda, la llum blava-violada cau sobre l'objecte. Excita la luminescència. Però aquesta llum pot interferir en veure la resplendor. Per tant, en el camí cap a l'ull, queda tallat per un filtre groc. La il·luminació es configura segons el mètode Koehler, amb una excepció. El diafragma del condensador ha d'estar completament obert. En examinar, és important utilitzar un oli d'immersió no fluorescent. Per reduir la seva pròpia brillantor, s'hi afegeix nitrobenzè (2-10 gotes / 1 g).

Aplicació de microscòpia de fluorescència
Aplicació de microscòpia de fluorescència

Microscòpia de luminescència: aplicacions en microbiologia

Els beneficis d'aquest tipus d'estudi són:

  1. Capacitat d'imatge en color.
  2. Elements d'autoemissió d' alt contrast sobre fons negre.
  3. Detecció i localització de certs tipus de virus i microbis.
  4. La capacitat d'estudiar transparent i opacorganismes vius.
  5. Estudi dels processos vitals en les seves dinàmiques.

També cal dir que la microscòpia luminescent contribueix al desenvolupament dels millors mètodes d'histoquímica i citoquímica, diagnòstic exprés.

Recomanat: