El brou de selenita és un medi d'enriquiment amb propietats selectives, dissenyat per aïllar bacteris patògens del gènere Salmonella (lat. Salmonella). És molt eficaç si cal detectar aquest patogen en particular entre altres representants de la microflora intestinal. El medi s'utilitza tant per al diagnòstic clínic com amb finalitats sanitàries en proves d'aliments.
Característiques generals
El brou de selenita es prepara a partir d'una pols, que és una barreja homogeneïtzada de diversos components de la composició. El color del material sec pot ser groc clar o crema, segons el tipus de medi. La pols té propietats de flux lliure.
El brou de selenita llest és un mitjà líquid transparent de color groc clar. Aquesta massa s'aboca en recipients on es duu a terme la sembra per a una posterior incubació.
Hi ha tres tipus principals de brou de selenita:
- medi pur: adequat per a l'aïllament de Salmonel·la tant de material clínic com sanitari;
- amb l'addició de manitol (brou de dos components): dissenyat només per treballar amb material clínic;
- Cisteïna-selenita medi: es pot utilitzar per aïllar la Salmonel·la del biomaterial patològic del pacient (excrements, orina, etc.).
Aquests tipus són lleugerament diferents en composició i característiques d'acció.
La tasca principal del brou de selenita és promoure l'acumulació de salmonel·la, inhibint el creixement de la microflora que l'acompanya. Això fa possible no només detectar el patogen en el material, sinó també transferir-lo posteriorment a l'agar. El medi va ser desenvolupat per Leifler, que va descobrir per primera vegada l'efecte selectiu de la selenita contra la Salmonel·la.
Composició
El brou de selenita conté:
- hidrolitzat de caseïna;
- lactosa;
- fosfat de sodi;
- hidroselenit de sodi.
El medi selenita-cisteïna, a més d'aquests components, conté L-cisteïna i hidrogen fosfat de sodi. La composició del brou de manitol difereix perquè, en lloc de l'hidrolitzat de caseïna, inclou la digestió pèptica del teixit animal. No hi ha lactosa en aquest entorn, però sí manitol. Aquest últim actua com a substrat fermentable i proporciona les propietats amortidores del brou.
Tots els components de la pols, excepte la hidroselenite de sodi, s'anomenen condicionalment part A i la substància selectiva s'anomena part B.
El principi de funcionament i les propietats de l'entorn
El brou de selenita funciona com a mitjà d'emmagatzematgeamb acció selectiva. L'efecte selectiu es proporciona a causa de la toxicitat de la selenita, que inhibeix el creixement de la majoria de microorganismes. Al mateix temps, els bacteris del gènere Salmonella són capaços de restaurar aquest compost, eliminant així l'efecte tòxic sobre les seves pròpies cèl·lules. Tanmateix, com a resultat de la reacció, es forma un àlcali, que redueix l'efecte perjudicial de la selenita sobre el creixement de la microflora associada i, per tant, es fa necessari estabilitzar el pH. Aquesta funció la fan bacteris que fermenten la lactosa amb la formació d'àcid. L'amortiment del medi és proporcionat pel fosfat.
En el brou de dos components, el pH s'estabilitza amb manitol. El medi de cisteïna millora l'efecte selectiu contra la Salmonel·la. Aquest brou és eficaç per controlar el fons infecciós en pacients amb un estadi no agut de la mal altia o en convalescents.
La manifestació de les característiques de creixement de les soques de referència en el medi es pot observar després de 12-24 hores des de l'inici de la incubació. En aquest cas, la Salmonel·la forma colònies incolores.
Funcions de cuina
La preparació del medi es realitza en dues etapes. En primer lloc, es fa una solució amb un component selectiu a raó de 4 grams de selenita de sodi per litre d'aigua destil·lada. A continuació, afegiu 19 grams de pols principal (part A). La solució es barreja a fons i s'escalfa fins que les partícules es dissolguin completament, després s'aboquen en tubs d'assaig estèrils.
Quan es cuina, és important seguirrègim de temperatura, ja que el medi és inestable al sobreescalfament. L'esterilització del brou només es pot dur a terme en un bany maria o amb un raig de vapor. L'autoclau del medi està estrictament prohibit.
