Assaig radioimmune en microbiologia: aplicació, mecanisme

Taula de continguts:

Assaig radioimmune en microbiologia: aplicació, mecanisme
Assaig radioimmune en microbiologia: aplicació, mecanisme
Anonim

La medicina moderna disposa de mètodes de diagnòstic específics que permeten establir l'etiologia de les mal alties en humans a partir de la definició del patogen, substàncies genèticament alienes que estimulen la resposta immune, àcids nucleics, així com alteracions al·lèrgiques i immunitàries. que es produeixen a causa de les seves accions. Avui dia, RIA s'utilitza àmpliament en immunologia i virologia, és a dir, radioimmunoassaig, els objectius d'establir, components, el curs, la comptabilitat dels quals, considerarem en aquest article. Aquest assaig és capaç de detectar antígens com a resultat de la seva interacció amb anticossos.

radioimmunoassaig
radioimmunoassaig

Definició

RIA és un mètode per diagnosticar substàncies biològicament actives en líquids, que es basa en la reacció d'antígens amb anticossos quan s'utilitzen substàncies anàlogues marcades amb radionúclids que tenen sistemes d'unió especials. Després de la seva interaccióes forma un complex immune, que es separa i s'estudia la seva radioactivitat. Se sap que el radioimmunoassaig es realitza amb kits de reactius estàndard.

Cada reactiu és capaç de determinar la concentració d'una substància específica. El líquid biològic extret d'una persona es barreja amb un reactiu, després del període d'incubació, es separen les substàncies radioactives lliures i lligades, després es realitza la radiometria i es calculen els resultats. S'utilitza un isòtop de iode per etiquetar les substàncies. Està marcat i afegit en una quantitat determinada.

microbiologia de radioimmunoassaig
microbiologia de radioimmunoassaig

Aplicació

L'anàlisi radioimmune té una àmplia aplicació en medicina i microbiologia. S'utilitza per diagnosticar mal alties del cor i vasculars, mal alties del sistema endocrí i altres sistemes corporals. Les RIA també s'utilitzen sovint per identificar la causa de la infertilitat, la patologia del desenvolupament fetal. En oncologia, aquesta anàlisi es realitza per tal de determinar els marcadors de les neoplàsies per tal de poder controlar l'eficàcia del tractament. En immunologia, RIA s'utilitza per estudiar la presència d'immunoglobulines, enzims, proteïnes, etc. a la sang. Avui dia, aquesta anàlisi permet detectar la concentració de diverses hormones fins a una milionèsima part d'un gram. Així, l'anàlisi de sang radioimmune s'utilitza àmpliament en cardiologia, oncologia, endocrinologia, ginecologia i virologia.

aplicació de radioimmunoassaig
aplicació de radioimmunoassaig

Mètodes RIA

S'acostuma a distingir entre diversos mètodes d'anàlisi, segons la naturalesareaccions:

  1. El mètode no competitiu es caracteritza per components de reacció com antígens estàndard i detectables, solució tampó, anticossos marcats amb isòtops, determinats anticossos que s'uneixen al sorbent. S'afegeix un antigen als anticossos a provar. Després de la incubació, apareixen complexos antigen-anticossos, es renta el sorbent, s'afegeixen anticossos marcats, que s'uneixen a l'antigen del complex. La radioactivitat depèn de la concentració de l'antigen que s'està provant.
  2. El radioimmunoassaig competitiu està impulsat per la competència d'antigens. Aquí hi ha components de la reacció com antígens de control i determinats, una solució tampó, certs anticossos que s'uneixen al sorbent, així com un antigen marcat amb isòtops. El diagnòstic comença amb la introducció de l'antigen que s'està examinant. Es forma un complex antigen-anticossos al sorbent. A continuació, es renta el sorbent i s'injecta l'antigen marcat. En fer-ho, s'uneix a l'anticossos. Amb l'ajuda de comptadors, es mesura la reacció i la quantitat de radioactivitat. Estarà en proporció inversa a la quantitat d'antigen de la mostra.
  3. El mètode indirecte és el més comú. En aquest cas, el radioimmunoassaig del component de reacció té com ara sèrum de control i prova, antígens o anticossos que s'uneixen al sorbent, anticossos marcats amb isòtops, solucions tampó. Els anticossos o antígens que es diagnostiquen reaccionen amb els antígens o els anticossos que s'uneixen al sorbent. A continuació, s'elimina l'incubació, s'injecten anticossos marcats, que s'uneixencomplexos antigen-anticossos.

Metodologia d'anàlisi

Per tant, el radioimmunoassaig es realitza amb reactius especials. Els conjunts són estàndard, de manera que no es permet cap error o infracció. Els resultats del diagnòstic són fiables. L'anàlisi es fa al matí, per això prenen sang venosa d'una persona. Al laboratori, el sèrum es separa de la sang, que s'utilitzarà per a la RIA. Aquest sèrum es barreja amb reactius. La mescla resultant s'incuba a una temperatura determinada en un termòstat.

Els isòtops lliures i lligats es separen a la barreja resultant. Després d'això, s'examina el material rebut i es calculen els resultats. El mecanisme de radioimmunoassaig té diverses opcions. La tècnica descrita anteriorment és una RIA en fase líquida, ja que tots els components estan en estat líquid. Hi ha RIA i fase sòlida, on els anticossos es col·loquen en un transportador que no es dissol en líquid.

anàlisi de sang radioimmune
anàlisi de sang radioimmune

Disponibilitat de diagnòstics

L'ús d'aquest mètode de diagnòstic en medicina és cada vegada més popular cada any. Recentment, el radioimmunoassaig s'ha convertit en un mètode de diagnòstic estàndard que pot ser prescrit per un metge quan fa un diagnòstic final. Durant molt de temps aquest tipus d'anàlisi es feia només en laboratoris, avui s'ha convertit en un mètode d'investigació habitual. Però RIA requereix l'ús d'equips cars (comptadors gamma) i els kits de reactius tenen una vida útil curta. Tot això és el principal inconvenient d'aquesta anàlisi, que en determinacost car.

A més, la RIA ha començat recentment a suplantar els mètodes de recerca més moderns que no requereixen interacció amb isòtops. Aquests inclouen immunoassaig enzimàtic. Per tant, la RIA és desitjable en moltes clíniques. Fa temps que s'utilitza a les grans ciutats i als centres de diagnòstic, però als hospitals ordinaris de les ciutats petites aquesta anàlisi pràcticament no s'utilitza a causa del seu alt cost.

components de radioimmunoassaig
components de radioimmunoassaig

Dignitat de RIA

El radioimmunoassaig té molts avantatges. És bastant específic i té una alta sensibilitat, cosa que permet determinar la presència de substàncies biològicament actives en quantitats increïblement petites. Aquesta anàlisi es realitza de manera molt senzilla, una persona només està obligada a donar sang venosa. Els resultats de les proves són 100% precisos i estan preparats l'endemà. RIA també es pot automatitzar fàcilment. Així, aquesta anàlisi permet identificar proteïnes que són productes de rebuig de bacteris infecciosos, la qual cosa indica la presència d'una infecció al cos.

anàlisi radioimmune de l'objectiu d'establir la comptabilitat del progrés dels components
anàlisi radioimmune de l'objectiu d'establir la comptabilitat del progrés dels components

Diagnòstic en virologia

La RIA més prometedora és la de virologia, perquè permet identificar ràpidament els patògens virals. Això es deu al fet que en els darrers anys ha anat creixent la incidència de diverses infeccions, que s'estan estenent a gran velocitat, provocant mortalitat entre les persones. Això és especialment cert per als països que no tenen un altdesenvolupament social i econòmic (els països de l'Extrem Orient), el radioimmunoassaig és simplement indispensable aquí. La microbiologia també utilitza aquest mètode de diagnòstic per detectar mal alties infeccioses causades per bacteris patògens. Per exemple, la RIA s'utilitza àmpliament per detectar la febre tifoide. En els primers dies de la mal altia, abans de la cita del tractament, cal fer un estudi de femta i vòmits. Tanmateix, els resultats del diagnòstic s'obtindran després de molt de temps. Aquí RIA ve al rescat, l'anàlisi permet identificar l'agent causant de la mal altia en poc temps. Una persona dona sang, l'endemà els resultats de l'estudi estan a punt. Aquesta anàlisi ajuda a fer un diagnòstic precís.

Resultats

El radioimmunoassaig és actualment un dels mètodes de diagnòstic més sensibles. S'utilitza per analitzar qualsevol substància contra la qual es puguin obtenir anticossos. Aquest mètode permet fer moltes mostres en el volum més petit del líquid investigat, així com registrar els resultats en el menor temps possible, ja que pot ser totalment automatitzat. Aquesta anàlisi va ser desenvolupada a la dècada de 1950 per Solomon Burson. Trenta anys després, es va generalitzar. Fins ara, no hi ha una alternativa cent per cent a la RIA, ja que l'anàlisi té una alta sensibilitat. La RIA s'utilitza en diverses branques de la medicina, així com en microbiologia i virologia.

mecanisme de radioimmunoassaig
mecanisme de radioimmunoassaig

Finalment

L'ús del mètode en virologia és molt rellevant avui dia, ja que dónala capacitat d'investigar la propagació de les infeccions, fer un diagnòstic precís i prescriure un tractament específic. Aquest problema és especialment rellevant per als països que tenen un baix nivell de desenvolupament econòmic i social. A més, aquesta anàlisi permet detectar la quantitat d'hormones i enzims del cos humà. Per obtenir resultats fiables, l'investigador només necessita donar sang per analitzar-la. La medicina no s'atura, juntament amb el radioimmunoassaig, apareixen nous mètodes de recerca, però la RIA continua sent un dels líders en diagnòstic mèdic.

Recomanat: